/或糖酵解丙酮酸向

[alamin4471]

t 检验来确定 DMD 和对照之间的统计学显着差异。* p < 0.05，** p < 0.01。B：呼吸复合物亚基 (OXPHOS) 的蛋白质印迹以及从多个分化批次获得的六个生物样品的实验重复的定量。应用非参数 t 检验来确定 DMD 和对照之间的统计学显着差异。* p < 0.05，** p < 0.01。C：来自 DMD 和对照患者的 iPSC 来源的心脏成纤维细胞中 ATP 水平的定量（左图）。将细胞与糖酵解抑制剂碘乙酸钠一起孵育 60 分钟，以评估糖酵解依赖性 ATP 的产生（右图）。三个生物样本中




C-fibs产生乳酸的能力增强（图 3C）。葡萄糖转C级执行名单运蛋白 1 (GLUT-1) 表达增加进一步支持了 DMD hiPSC-fib 中糖酵解途径的普遍存在，这强调了与对照 hiPSC-fib 相比，DMD hiPSC-fib 中葡萄糖主要用于细胞代谢(图 3D )。 DMD hiPSC-fibs 显示线粒体呼吸减少 在 DMD hiPSC-fib 中观察到的乳酸产量上调可能反映了线粒体功能的改变和乙酰辅酶 A 的转化受损，从而耗尽了线粒体的高能底物供应。因此，我们评估了丙酮酸

脱氢酶复合物的表达和 PDHE1a 亚基的磷酸化，这降低了复合物的酶活性。DMD hiPSC-fibs 显示 PDH E1a 磷酸化减少，表明丙酮酸脱羧成乙酰辅酶 A 的能力更有效，从而供给 TCA 循环并通过氧化磷酸化 (OXPHOS) 产生能量）（图 3 ）E）。接下来，我们使用 Seahorse 分析仪上的细胞线粒体压力测试评估了 DMD hiPSC-fib 的线粒体呼吸。在 DMD 中观察到线粒体呼吸下调，表现为基础呼